Серологическое исследование

Для диагностики инфекционных болезней рыб существует ряд серологических реакций: агглютинации, иммунной гемагглютинации, преципитации, пассивной гемагглютинации, опсоно-фагоцитарной нейтрализации (вирусов, токсинов), непрямой иммунофлуоресценции.

С целью проведения реакции агглютинации готовят диагностикумы - штаммы бактерий, выращенных на мясо-пептонном агаре и образующих S-формы. Культуру смывают забуференным изотоническим раствором (NaCl - 0,85 г, 0,158 М фосфатный буфер с рН 7,17 10 мл дистиллированная вода до 100 мл) или 0,9%-ным раствором NaCl. Взвесь центрифугируют. В качестве диагностикума применяют живые или убитые (0,3%-ным формалином или 0,5 %-ным раствором фенола) бактерии.

Сыворотку крови рыб хранят в замороженном или высушенном состоянии.

Учет результатов проводят после окончания инкубации по 4-крестовой системе. Титром сыворотки является наибольшее разведение, которое дает реакцию не менее чем на 2 креста.

Схема постановки осадочной реакции агглютинации бактерий в панели с лунками

Перемешивание содержимого лунок, инкубация 4 ч при 37°С, вновь перемешивание, экспозиция при комнатной температуре 18-20 ч.

Для экспресс-диагностики используют также капельную РА на стекле с поливалентными и моноспецифическими сыворотками. Реакцию ставят и учитывают общепринятым методом.

Остальные серологические реакции пока не нашли широкого применения в производственных ветеринарных лабораториях, а используются в научно-исследовательских институтах.